Nature Methods：信号传导研究的有力工具

多伦多大学的研究人员在酵母双杂交系统的基础上，开发了研究哺乳动物膜蛋白互作的新技术，为科学家们提供了研究人类蛋白互作的更好途径。膜蛋白的相互作用是机体健康和疾病发展中的关键过程。

信号传导对于细胞正常功能和疾病发展都很重要，这一过程由细胞内的大量膜蛋白介导，这些蛋白能根据外界刺激发生相应的改变。在人类的身体中，基本上三分之一的蛋白都是膜蛋白。据统计，这些蛋白的功能障碍与超过五百种疾病有关。然而，要研究这些蛋白的作用机制并不容易，因为理解它们的实际功能，依赖于分析膜蛋白与其它蛋白的互作情况。

“我们的新技术，可以在人类细胞的天然环境中检测膜蛋白发生的相互作用，”多伦多大学的Igor Stagljar教授说。“同时，这一技术还可以灵敏的检测到药物介入引起的微小变化，在药物研发领域有着广阔的应用前景，特别是癌症和神经学疾病方面。”

酵母双杂交系统是在酵母体内分析蛋白质相互作用的常用遗传学方法。Stagljar及其研究团队花了四年时间，在酵母双杂交系统的基础上，开发了哺乳动物膜双杂交技术MaMTH（Mammalian-Membrane Two-Hybrid assay）。MaMTH技术可以检测人类细胞中的膜蛋白相互作用，主要针对依赖刺激物和磷酸化的膜蛋白互作。这一研究于三月二十三日发表在Nature Methods杂志的网站上。

非小细胞肺癌是目前最常见的一种肺癌，研究人员利用MaMTH技术对这种疾病中的蛋白互作进行了研究。表皮生长因子受体EGFR发生突变，会引起癌细胞增殖，目前已经有一些已批准和正在研发的抗癌药物将其作为治疗靶标。

研究人员利用MaMTH进行筛选，发现CRKII可以与致癌的突变EGFR相互作用，促使非小细胞肺癌中的异常信号传递持续激活。

“CRKII很可能调控着突变EGFR的稳定性，并通过促进癌细胞信号传递，推动癌症的发展，”文章的第一作者Julia Petschnigg说。“我们研究后发现，通过联合化疗将突变受体和CRKII的抑制结合起来，对于治疗肺癌有很大的帮助。”

研究人员指出，MaMTH是一个有力的新工具，可以为人们展示人类膜蛋白的动态互作组。下一步，他们将把这一技术应用于其他人类疾病中的一些突变蛋白。