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避免细胞培养中污染的小技巧

日期:2010-08-17 14:05:37

细胞培养对细胞工程,基因工程以及胚胎工程等生物工程研究非常重要。其在培养过程中非常容易污染,严重影响了实验的进程。

方法改进:为了减少细胞培养过程污染的概率,特做如下小小改进: 为保证传代培养的正常进行不被污染,整个试验过程都要求无菌意识,换液或传代消化细胞时,培养皿盖始终不能离开培养皿,只要满足操作即可。为避免或减少细胞污染几率,放入培养箱预平衡的培养液至少有3瓶,同批次细胞尽量使用不同培养瓶内液体,培养24 h后观察以确保液体无污染。不同批次培养液最好交叉使用3-5 d,以防配制的新液体存在污染,并且新配制的培养液提前放入培养箱预平衡至少24 h,确认无污染后再使用。细胞传代培养过程中要定时在显微镜下观察,一旦发现培养皿内液体浑浊或呈现黄色(主要是细菌污染)、有葡萄串状黑色团絮、树枝状,管状或线团状物质(主要是真菌污染)以及大量细胞碎片等表明细胞污染,应及时采取措施处理或丢弃,以防污染其它正常细胞,造成交叉污染。另外,每次换液前均应在灯光下轻轻摇动培养瓶,仔细观察培养瓶内培养液,如发现培养液浑浊或有絮状漂浮物等均应丢弃。

结果:经过多次细胞培养,均可以获得成功!并且本人培养的细胞已经顺利传到60代以上,没有见污染现象!